
免疫組化陰性對照的組織選擇其實有明確的黃金法則:?基因敲除樣本,沒有的話就用天然低表達組織?。具體幫你整理好了:
一、方案:基因敲除樣本
?操作?:用基因敲除(KO)或敲低(KD)的組織,比如CD4檢測用CD4-KO小鼠
?優勢?:結果,能直接排除抗體交叉反應
二、備選方案:天然低表達組織
?操作?:查Human Protein Atlas找目標蛋白低表達的組織
?示例?:PD-L1檢測用正常肺組織
三、關鍵操作要點
?同步處理?:和實驗組用同一批固定液、同種修復方法
?驗證?:若陰性對照顯色,可能是抗體交叉反應或封閉不充分
?記錄?:標注組織來源和處理條件,方便追溯
四、常見問題
?假陽性?:陰性對照顯色→排查抗體特異性或封閉步驟
?假陰性?:陰性對照未顯色→檢查抗體效價或顯色試劑
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